點對點酵母雙雜交驗證實驗流程
1、誘餌蛋白毒性及自激1活檢測;
2、共轉(zhuǎn)化:分別將誘餌/捕獲質(zhì)粒(pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey)、陽性對照質(zhì)粒(pGBKT7-p53/pGADT7-T)、陰性對照質(zhì)粒(pGBKT7-Lam/pGADT7-T)分別共轉(zhuǎn)到Y(jié)2H Gold感受態(tài)細胞中,涂布于DDO平板培養(yǎng);
3、點板驗證:分別從平板上挑單克1隆稀釋10倍、100倍、1000倍,然后點板到TDO/X/A和QDO/X/A固體培養(yǎng)基進行驗證;
4、實驗數(shù)據(jù)與報告整理。
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