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外泌體的組成:外泌體主要含有融合蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白、熱休1克蛋白(HSP 70)、CD類蛋白以及磷脂酶和其他脂質(zhì)相關(guān)蛋白,但是不同來源的外泌體的組成有差異。

外泌體的提取方式:

1、離心法:此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足。

2、過濾離心:這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣純度不足。

3、密度梯度離心法:用此種方法分離到的外泌體純度較高,exo粒徑服務(wù),但是前期準備工作繁雜

4、免1疫磁珠法:這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單,但生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性。

5、色譜法:此種方法分離出的外泌體大小均一,但設(shè)備特殊,應(yīng)用不廣泛。

外泌體是由細胞分泌的納米級膜性小囊泡,直徑約30~150nm。外泌體來源多樣,廣泛存在并分布于各種生物液體中,富含來源細胞的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸,參與細胞間的信息交流。不同病理和生理條件下,外泌體的內(nèi)容物不盡相同,因此外泌體可以很好地反映生物體的疾病與健康狀態(tài)。此外,外泌體特殊的膜結(jié)構(gòu)能夠保護其內(nèi)容物如RNA(microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA)免受酶的降解,保證其能在各類體液中被穩(wěn)定檢測到,因此外泌體是研究各種疾病的良好生物學材料,可作為腫1瘤潛在的biomarker和治1療靶點,亦可作為基因/藥1物的遞送載體,在疾病的診斷和治1療方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

國際細胞外囊泡學會(ISEV) 在2014年的提議,對于提取獲得的外泌體,需要通過以下手段進行確認:

雙層囊膜結(jié)構(gòu)是外泌體重要標志之一,但普通光學顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可達0.1 ~ 0.2 nm,可將被觀察物體放大至數(shù)百萬倍,非常適合進行外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測。

表觀生物技術(shù)團隊擁有豐富的外泌體電鏡樣本處理與鑒定經(jīng)驗,可為客戶提供高質(zhì)量外泌體TEM檢測服務(wù),獲得樣本中外泌體典型形態(tài)特征圖片 (如圖一)。

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